感受態配套產品

                                               Carrier DNA說明書





產品規格

 

產品名稱

貨號

規格

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Carrier DNA

YC5002S

10μg/μl, 100 μl

-20, 12個月

Carrier DNA

YC5002M

10μg/μl, 1 ml

-20, 12個月

 

產品說明


      Carrier DNA (鮭魚精DNA) 為短的線形單鏈DNA,可包裹質粒DNA,在酵母細胞攝取外源質粒DNA過程中發揮作用,促進質粒進入酵母細胞,另外還可保護質粒免于被DNA酶降解。在每次使用前務必進行兩次熱變性,保證Carrier DNA在轉化實驗體系中以單鏈形式存在。Carrier DNA是唯地生物生產的酵母感受態細胞轉化所必需的配套試劑,每個轉化反應需要10 μl Carrier DNA

 

操作方法

 

1. Carrier DNA 在每次使用前要通過加熱處理使其變性為單鏈狀態,步驟如下:Carrier DNA 95℃水浴或金屬浴3 min,快速插入冰中,靜置3 min,再次放95℃水浴或金屬浴3 min,快速插入冰中,靜置3 min以上。

2. 100 μl冰上融化的酵母感受態細胞,依次加入預冷的目的質粒2-5 μgCarrier DNA 10 μlPEG/LiAc 500 μl并吸打幾次混勻,30℃水浴30 min (15 min時翻轉6-8次混勻)

3. 將管放42℃水浴15 min (7.5 min時翻轉6-8次混勻)

4. 5000 rpm離心 40 s棄上清,ddH2O 400 μl 重懸,離心 30s棄上清。

5. ddH2O 50 μl重懸,涂板,29℃培養48-96 h

 

注意事項


 1. 在每次使用前務必進行兩次熱變性,保證Carrier DNA在轉化實驗體系中以單鏈形式存在。

2. Carrier DNA 可在4℃短時間保存,如需長時間保存請放-20


  

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