Carrier DNA說明書

● 產品規格

● 產品說明

      Carrier DNA (鮭魚精DNA) 為短的線形單鏈DNA，可包裹質粒DNA，在酵母細胞攝取外源質粒DNA過程中發揮作用，促進質粒進入酵母細胞，另外還可保護質粒免于被DNA酶降解。在每次使用前務必進行兩次熱變性，保證Carrier DNA在轉化實驗體系中以單鏈形式存在。Carrier DNA是唯地生物生產的酵母感受態細胞轉化所必需的配套試劑，每個轉化反應需要10 μl Carrier DNA。

● 操作方法

1. Carrier DNA 在每次使用前要通過加熱處理使其變性為單鏈狀態，步驟如下：Carrier DNA 放95℃水浴或金屬浴3 min，快速插入冰中，靜置3 min，再次放95℃水浴或金屬浴3 min，快速插入冰中，靜置3 min以上。

2. 取100 μl冰上融化的酵母感受態細胞，依次加入預冷的目的質粒2-5 μg，Carrier DNA 10 μl，PEG/LiAc 500 μl并吸打幾次混勻，30℃水浴30 min (15 min時翻轉6-8次混勻)。

3. 將管放42℃水浴15 min (7.5 min時翻轉6-8次混勻)。

4. 5000 rpm離心 40 s棄上清，ddH₂O 400 μl 重懸，離心 30s棄上清。

5. ddH₂O 50 μl重懸，涂板，29℃培養48-96 h。

● 注意事項

 1. 在每次使用前務必進行兩次熱變性，保證Carrier DNA在轉化實驗體系中以單鏈形式存在。

2. Carrier DNA 可在4℃短時間保存，如需長時間保存請放-20℃。